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J6-1白血病细胞P2X7受体基因的克隆和功能初步分析


发布:www.liulingling.com 来源:医学杂志
2006年12月26日 中华血液学杂志 2006 Vol.27 No.9 P.602-605 10 (天津)为了从白血病细胞系J6-1细胞中克隆P2X7受体编码区全序列并研究其功能。研究者用RT-PCR法从J6-1细胞中扩增P2X7受体编码区全序列,克隆到一ARGET真核表达载体,并进行DNA序列分析;然后转染HEK293细胞,获得稳定表达细胞株,RT-PCR和Western blot法检测P2X7受体在HEK293中的表达,相差显微镜下观察转染细胞在激动剂刺激下膜泡的形成。结果 从J6-1细胞中克隆了P2X7受体编码区全序列,在第559位有1个A→G有义突变,导致Asn187→Asp182,J6-1细胞来源的P2X7受体可在HEK293细胞中表达,在激动剂作用下可介导膜泡的形成。可见 从白血病细胞中克隆出具有正常功能的P2X7受体编码区全序列,J6-1细胞中可能存在其它未知的机制造成P2X7受体功能丧失。
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