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标题
大分子右旋糖酐检查法
附录序号
附录Ⅻ
内容全文
A. 大分子右旋糖酐检查法 仪器装置 如图。A为内径1.5～1.55cm、高58cm、底部为烧结玻璃的玻璃柱，上接内径4.0～4.1cm、高22cm的加胶管B，B的上端连接恒压贮液瓶C,以上各连接处均为玻璃磨砂接口，B的下端连一出水导管D，E为接受洗脱液试管。 操作方法 (1) 凝胶的浸泡 称取葡聚糖凝胶(右旋糖酐70用G－150,右旋糖酐40用G－100)7～10g，加水200ml，在水浴中加热5小时，时时轻轻搅拌,并趁热反复更换凝胶的上层液，以除去其中的杂质及过细的胶粒。 (2) 装柱 于柱A内加满水，接上加胶管B，然后于充分泡胀的凝胶中加入约为凝胶容量1／4体积的水，搅拌均匀后，沿管壁装入加胶管中，加胶管与贮液瓶C相连,用水流洗，葡聚糖凝胶G－100流速为每小时20ml，G－150流速为每小时15ml,流洗量相当于2～3个凝胶床的总体积(约200～300ml),使柱床平衡、稳定、移去加胶管,吸去多余的凝胶,使凝胶高度达50cm。 (3) 加样 加样前小心吸去凝胶面上的液体，并用出水导管使胶面液体流完，立即按各药品项下的规定量，分两次缓缓加入供试品溶液，开始收集并计量，待供试品溶液完全渗入胶面后，用水约2ml分两次冲洗管壁，然后缓缓加水至胶面并与贮液瓶相连， 调节流速，葡聚糖凝胶G－100每小时约20ml，G－150每小时约15ml，在一定的压力下进行洗脱。 (4) 洗脱 加样后，待收集的洗脱液为凝胶总体积1／4左右时，开始分段收集，每管约3ml,照旋光度测定法（附录Ⅵ E），分别测定右旋糖酐含量，当合并洗脱液中右旋糖酐的含量为加入量的10±0.5％时,为一个级分，共收集两个级分，准确浓缩或稀释至10ml，供测定含量和特性粘数用。 凝胶柱继续洗脱，直至不含右旋糖酐为止，以备下次使用。 (5) 大分子部分含量测定 取上述洗脱液，用长度0.5dm的测定管,照旋光度测定法测定（附录Ⅵ E），测得的旋光度乘以1.0256，即为每100ml中的含量(g)。 (6) 大分子部分特性粘数测定 取上述大分子部分含量测定项下溶液，照粘度测定法（附录Ⅵ G 第三法），自“用3号垂熔玻璃漏斗滤过”起,依法测定[η]<[1]>及[η]<[2]>，按下式计算10％大分子部分的特性粘数。 [η]<[1]>＋[η]<[2]> [η]<[1]>×A<[1]>－────────────(A<[1]>－10) 2 ［η］＝───────────────────────── 10 式中 [η]<[1]>为收集第一级分溶液的特性粘数； [η]<[2]>为收集第二级分溶液的特性粘数； A<[1]>为第一级分溶液含右旋糖酐量相当于总加入量的百分数。 |
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