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2006年11月27日 中国胸心血管外科临床杂志 2006 Vol.13 No.3 P.180-183 25 (合肥)为了观察重组质粒人血管内皮生长因子165基因与质粒载体pcDNA3.1的重组体(hVEGF165/pcDNA3.1)在心肌细胞中的表达,为冠心病的基因治疗和细胞移植治疗研究奠定基础。研究者体外培养小鼠心肌细胞,脂质体介导hVEGF165/pcDNA3.1转染心肌细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫化学方法和免疫印迹法(Western blotting)检测其在心肌细胞中的瞬时表达。结果 RT-PCR扩增得到与hVEGF165大小一致的目的条带,细胞免疫化学法检测到心肌细胞胞质中hVEGF蛋白,Western blotting在培养的细胞上清液中检测到hVEGF蛋白。可见构建的重组质粒hVEGF165/pcDNA3.1能在体外培养的小鼠心肌细胞中表达,可用于冠心病的基因和细胞移植治疗研究。 |
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