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本报陕西讯 葎草为多年生缠绕草本植物，全草可以入药，其花粉是西北主要的致敏原。西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科的刘昀博士等，日前采用Trizol试剂法抽提葎草花粉总RNA，在西北地区首次成功构建出一个含有5×105重组子的中药葎草花粉cDNA表达文库。 花粉致敏引起的变态反应病，是影响人类健康的主要因素之一。采用基因重组技术制备变应原疫苗，并用于变态反应性疾病的诊断和治疗，是国内外变态反应领域研究的热点。近年来，国外已构建了许多花粉的cDNA文库，一些主要变应原成分及致敏蛋白组分已被克隆和纯化，如桦树花粉、豚草花粉、杉树花粉及樱桃花粉等。有研究表明，葎草花粉是西北地区最主要的气传致敏原之一，其空气中的花粉量计数仅次于篙属花粉。 为构建葎草花粉cDNA表达文库，深入研究葎草花粉主要变应原，刘昀等研究人员自2004年起，将采集的葎草花粉通过分样筛选，利用Trizol法抽提葎草花粉总RNA，纯化后用多重聚合酶链反应（PCR）法反转录合成cDNA，并进行cDNA片段与载体的连接及体外包装，包装物经孵育后，计算其蓝白斑比例、噬菌斑数、噬菌体滴度及库容量。在此基础上，再用PCR法进行文库重组率的测定及插入片段大小的鉴定，从而成功地构建出葎草花粉cDNA表达文库。 刘昀等研究人员认为，研究表明，葎草花粉变应原皮内试验阳性者达70%，血清过敏原特异性IgE阳性率达67%。该文库的成功构建，为临床对于葎草花粉过敏引起的变态反应性疾病的诊断和治疗，以及对葎草花粉致敏蛋白组分的研究和重组葎草花粉变应原疫苗的研制，奠定了坚实的基础。 （吴一福） |
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