升压物质检查法

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标题升压物质检查法 附录序号 附录Ⅺ 内容全文 　　F.
　　升压物质检查法
　　本法系比较垂体后叶标准品（S）与供试品（T）升高大鼠血压的程度，以判定供试品中所含升压物质的限度是否符合规定。
　　标准品溶液的配制
　　照缩宫素生物检定法标准品溶液的配制法（附录XII
　　F），按垂体后叶标准品升压素单位计算，配成每1ml中含1单位的溶液，分装于适宜的容器内，4～8℃贮存，如无沉淀析出，可在3个月内使用。
　　标准品稀释液的配制
　　临用前，精密吸取标准品溶液适量，用氯化钠注射液配成每1ml中含0.1单位的稀释液。
　　供试品溶液的配制
　　按正文规定的限量，配成适当浓度的供试品溶液；试验时，供试品溶液与标准品稀释液的注入体积应相等。
　　检查法
　　取健康无伤、体重300g以上的成年雄性大鼠，用适宜的麻醉剂（如腹腔注射乌拉坦1g／kg）麻醉后，固定于保温手术台上，分离气管，必要时插入插管，以使呼吸通畅。在一侧颈静脉或股静脉插入静脉插管，供注射药液用，按体重每100g注入肝素溶液50～100单位,然后剥离另一侧颈动脉，插入与测压计相连的动脉插管，在插管与测压计通路中充满含适量肝素钠的氯化钠注射液。全部手术完毕后，将测压计的读数调节到与动物血压相当的高度，开启动脉夹,记录血压。缓缓注入适宜的交感神经阻断药(如甲磺酸酚妥拉明，按大鼠每100g体重注入0.1mg，隔5～10分钟用相同剂量再注射一次),待血压稳定后，即可进行药液注射。各次注射速度应基本相同，并于注射后立即注入氯化钠注射液0.5ml，相邻两次注射的间隔时间应基本相同(一般约为5～10分钟)，每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行。
　　选定高低两剂量的垂体后叶标准品稀释液（ml），高低剂量之比约为1∶0.6，低剂量应能使大鼠血压升高1.33～3.55kPa，将高低剂量轮流重复注入2～3次,如高剂量所致反应的平均值大于低剂量所致反应的平均值，可认为该动物的灵敏度符合规定。
　　在上述高低剂量范围内选定标准品稀释液的剂量（ds），供试品溶液按正文中规定的剂量（dT），照下列次序注射一组4个剂量：ds、dT、dT、dS,然后以第一与第三、第二与第四剂量所致的反应分别比较；如dT所致的反应值均不大于ds所致反应值的一半，即认为供试品的升压物质检查符合规定。否则应按上述次序继续注射一组4个剂量,并按相同方法分别比较两组内各对ds、dT所致的反应值；如dT所致的反应值均不大于ds所致的反应值，仍认为供试品的升压物质检查符合规定，如dT所致的反应值均大于ds所致的反应值，即认为供试品的升压物质检查不符合规定；否则应另取动物复试。如复试的结果仍有dT所致的反应值大于ds所致的反应值,即认为供试品的升压物质检查不符合规定.

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