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| 2007年01月09日 中华流行病学杂志 2006 Vol.27 No.10 P.889-893 13 （北京）为了建立检测狂犬病毒(RV)核蛋白(N)基因片段的TaqMan PCR检测方法。研究者 针对RV N基因保守区域设计特异性引物与探针；优化检测体系中引物与探针的浓度；以体外转录的RV完整的N基因RNA作为定量分析模型；考核检测体系灵敏性、特异性、稳定性；初步用于RV的检测。结果 引物和探针具有良好的特异性，使用浓度分别为0.6μmol/L和0.2μmol/L，可检测到2700个RNA拷贝数，较传统RT-PCR检测方法敏感性提高了10倍；同一样品Ct值重复检测5次，变异系数均＜5%，表明检测体系具有较好的稳定性；通过所建立的检测体系，绘制了以模板拷贝数为分析指标的RV定量检测标准曲线，对实验室内保存毒株的检测结果显示TaqMan PCR检测比普通PCR检测 |
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