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2005年05月18日 中华传染病杂志 2005 Vol.23 No.1 P.1-5 (徐州)为了构建并表达丙型肝炎病毒(HCV)不同病毒株:癌中心株(BT)、癌旁珠(BNT)、HCV-J及BT不同截短片段谷胱甘肽(GST)-核心融合蛋白,寻找核心蛋白(Core)与蛋白激酶R(PKR)相互作用区域,探讨它们在HCV持续感染及细胞癌(HCC)发病机制中的作用,研究者用聚合酶链反应扩增不同片段HCV核心蛋白基因,并将7个不同的基因片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,诱导表达并纯化表达蛋白,与两株细胞(HepG2和Huh-7)的PKR的进行相互作用试验。结果7个不同片段Core在体外都得到相应表达,不同片段结合PKR的能力存在一定差异。BT、BNT、C191的Core N端1~172氨基酸(aa)3个片段均能与PKP发生直接结合,BT与PKR结合的区域在Core N端的1~58aa。可见 不同片段Core在原核细胞中获得较好的表达,Core/PKP相互作,在HCV持续感染和HCC的发病机制中可能起重要作用。 |
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