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2006年07月12日 中华传染病杂志 2006 Vol.24 No.1 P.12-14 24 (北京)为了验证乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达蛋白在细胞内及细胞外的结合作用。研究者应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HepG2细胞中扩增AK026018基因序列,构建真核表达载体,与HBeAg真核表达载体共转染营养缺陷酵母细胞,观察生长情况.同时进一步应用网织红细胞裂解体外翻译及免疫共沉淀系统,验证AK026018蛋白与HBeAg间的确切结合作用。结果经限制性内切酶分析和DNA序列测定构建的AK026018重组表达载体正确。共转染后的酵母细胞在营养缺陷培养基中生长良好.体外免疫共沉淀实验可见特异放射自显影带。可见HBeAg与AK026018基因编码蛋白在细胞内及细胞外均能相互结合,推测该分子在HBV的致病过程中起着重要作用。 |
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