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| 2006年12月14日 中华内分泌代谢杂志 2006 Vol.22 No.4 P.367-371 10 （上海）为了以原核表达的小鼠肾上腺蛋白AD-004为免疫原，制备抗AD-004的兔多克隆抗体，并明确其在肾上腺、睾丸组织中的分布。研究者 将小鼠AD-004 cDNA克隆于原核表达载体PET28，经IPTG诱导AD-004的表达。用Ni2+-NTA纯化后的蛋白为免疫原制备抗AD-004多克隆抗体。通过Western印迹鉴定抗体特异性及效价，并用此抗体对小鼠睾丸、肾上腺组织进行免疫组织化学分析。结果 此原核表达系统可高效表达AD-004蛋白，Western印迹结果显示所制备的抗体具有很高的效价和特异性，免疫组化提示AD-004蛋白在肾上腺的髓质表达较高，而在睾丸中主要表达于间质的Leydig细胞。可见 本研究获得了小鼠AD-004原核表达蛋白，成功制备了AD-004多克隆抗体，并发现其在睾丸间质Leydig细胞表达最高，提示AD-004可能在睾丸性激素的合成过程中起重要作用。 |
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