表3-3 新霉素效价测定(3.3)法可靠性测验结果 ━━━━━━┯━━━┯━━━━━━━┯━━━━━━━┯━━━━━━┯━━━━━━ 变 异 来 源│ f │ 差 方 和 │ 方 差 │ F │ P ──────┼───┼───────┼───────┼──────┼────── 试品间 │ 1 │ 0.002 963 │ 0.002 963 │ <1 │ >0.05 回归 │ 1 │ 4.168 │ 4.168 │ 602.9 │ <0.01 偏离平行 │ 1 │ 0.000 069 44│ 0.000 069 44 │ <1 │ >0.05 二次曲线 │ 1 │ 0.014 47 │ 0.014 47 │ 2.1 │ >0.05 反向二次曲线│ 1 │ 0.006 690 │ 0.006 690 │ <1 │ >0.05 ──────┼───┼───────┼───────┼──────┼────── 剂间 │ 5 │ 4.1926 │ 0.8385 │ 121.3 │ <0.01 碟间 │ 8 │ 1.0018 │ 0.1252 │ 18.1 │ <0.01 误差 │ 40 │ 0.2765 │0.006 912 s<2>│ │ ──────┼───┼───────┼───────┼──────┼────── 总 │ 53 │ 5.4709 │ │ │ ━━━━━━┷━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━━┷━━━━━━┷━━━━━━
结论:回归非常显著(P<0.01),偏离平行、二次曲线、反向二次曲线均不显著(P>0.05),实验结果成立。 组内(碟间)差异非常显著(P<0.01),分离碟间差异,可以减小实验误差。
(3) 效价(PT)及可信限(FL)计算
按表十一(3.3)法及(30)~(33)、(3)、(8)式计算。
r=1:0.8 I=0.0969 S<2>=0.006 912 f=40 t=2.02(P=0.95)
PT及其FL计算
1
V=──(142.90+146.05+149.00-142.6-146.2-148.75)=0.1333
3
1
W=──(149.0-142.9+148.75-142.6)=3.0625
4
2.02<2>×0.006 912×9
g=───────────=0.007
4×3.0625<2>
12.5 0.1333
R=───. antilog(────×0.0969)=1.01
12.5 3.0625
P<[T]>=670×1.01=676.70u/mg
0.0969
S<[M]> = ────────×3.0625<2>
(1-0.007)
┌─────────────────────────
│ 2 1
│9×0.006 912[(1-0.007)─×3.0625<2>+─×0.1333<2>]=0.006 469
√ 3 4
log1.010
R的FL=antilog[─────±2.02×0.006 469]=0.980~1.041
(1-0.007)
P<[T]>的FL=670(0.980~1.041)=656.60~697.47u/mg
697.47-656.60
P<[T]>的FL%=[────────×100]%=3.0%
2×676.70
按(19)式计算S<2>
6×9(16.05<2>+16.20<2>+…16.50<2>+16.30<2>)
S<2>= ─────────────────────
6×9(6-1)(9-1)
6(142.6<2>+…+149.0<2>)-9(97.5<2>+…+95.85<2>)+875.5<2>
-─────────────────────────── = 0.006 912
6×9(6-1)(9-1)
f=(6-1)(9-1)=40
和表3-3结果相同。
例4 量反应平行线测定随机区组设计(2.2)法
缩宫素效价测定──大鼠离体子宫法
S为缩宫素标准品
ds<[1]>∶0.0068u
ds<[2]>∶0.009u
T为缩宫素注射液
标示量
A<[T]>∶10u/ml
dT<[1]>∶0.008u
dT<[2]>∶0.0106u
r=1∶0.75
I=0.125
反应(y):子宫收缩高度(mm)
测定结果见表4-1。
(1) 特异反应处理
表4-1第三列第四行dT<[1]>的第4个数值特小,本例为随机区组设计按(10)式计算决定此值是否属特异值。
m=5 y<[a]>=15 y<[2]>=35 y<[m]>=41
y<[2]>-y<[a]> 35-15
J<[1]>=──────── =────=0.77
y<[m]>-y<[a]> 41-15
查表三,m=5时,J<[1]>=0.73,小于计算值0.77, 故此值可以剔除。剔除后形成的缺项按(13)式补足。
C=149 R=149.5 G=929.5 K=4 m=5
4×149+5×149.5-929.5
缺项补足值y=─────────────=34.5
(4-1)(5-1)
表4-1 缩宫素效价测定结果 ────┬────┬────┬────┬────┬──── 剂量u │ds<[1]> │ds<[2]> │dT<[1]> │dT<[2]> │ ∑ym │ 0.0068 │ 0.0090 │ 0.0080 │ 0.0106 │ ────┼────┼────┼────┼────┼───── │ 39.5 │ 68.0 │ 41.0 │ 71.0 │ 219.5 │ 37.0 │ 62.5 │ 36.0 │ 53.0 │ 188.5 y │ 35.0 │ 63.0 │ 37.0 │ 62.0 │ 197.0 │ │ │ 34.5 │ │ │ 3