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免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)鞘内合成理论,近年来成为神经免疫学领域的一个热点问题。关于鞘内Ig的来源,说法不一,但各种观点的证据均是在中枢神经系统存在感染或炎症等病理情况下获得的。本研究将灭活嗜水气单胞菌经蛛网膜下腔与肌肉两种途径接种健康犬,定期检测血清与脑脊液中的特异性抗体,旨在通过分析抗体出现的时间及抗体水平的高低来评定鞘内抗体的产生规律。 12只2月龄土种幼犬,分成4组,每组3只。两个试验组分别经两种途径接种灭活细菌0.1ml/犬(5亿个细菌),相应对照组接种等量生理盐水。接种前(接种当天)、接种后10?d、15?d、20?d、30?d等不同时间内采集血液与脑脊液样本,进行嗜水气单胞菌抗体检测。 将接种用细菌超声裂解后作为包被用抗原,参照间接ELISA的常规程序检测样本中的抗体水平。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析样本中的抗体成分。 以A490值代表抗体水平,结果无论是蛛网膜下腔还是肌肉接种灭活细菌后,血清中特异性抗体水平均较接种前显著升高(P<0.05)。抗体在接种后第10~15天间升至最高,以后逐渐下降。方差分析显示,两种接种途径间血清抗体水平无显著差异(P>0.05)。所有脑脊液样本及对照组样本均未检出抗体。脑脊液PAGE图谱中未发现有抗体区带。 本研究所用犬为健康幼犬。实验过程中所有犬的健康状态良好,未出现脑炎的临床症状。两种接种途径中,细菌抗体在血清与脑脊液间均形成了明显的差异,提示外周血中抗体不能被动经过完好的血脑屏障。这一结果与Madle-Smardxija等的报道是相符合的,他们在研究病毒所致急性脑炎时发现鞘内抗体产生与血脑屏障完整性相关:血脑屏障越完好,鞘内抗体水平越低。 |
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