鲤鱼斯氏小体匀浆液对小鼠血浆钙和磷含量的影响

　　斯氏小体(corpuscles of Stannius,CS)是硬骨鱼类独有的内分泌腺，其分泌的斯钙素(st anniocalcin,STC)具有抑制鱼类鳃、肠的钙转运和促进肾小管对磷酸盐的重吸收以调节钙、 磷代谢的作用。现已证实，人和哺乳动物中也存在有STC，其生理作用表现在抑制肠对钙的 吸收、促进肠对磷酸盐的吸收及促进肾小管对磷酸盐的重吸收以调节钙、磷代谢，并且对鱼 的鳃钙转运也有抑制作用。那么鱼类CS分泌物能否对哺乳动物的钙、磷代谢产生影响呢?鱼 类CS匀浆液对大鼠血清钙、磷含量的影响已有报道，而鱼类CS匀浆液能否也对小鼠血清钙、 磷代谢产生影响，国内外未见报道。为此，我们观察了鲤鱼CS匀浆液对小鼠血浆钙、磷代谢 的影响。

　　1　材料方法

　　(1)实验材料　实验用昆明种小鼠由本院实验动物房提供，共计48只，体重19～26 g,雌性2 只雄性46只。用于制备CS匀浆液的鲤鱼(Cyprinus carpio)购自当地集贸市场，体重380～52 0 g，均为雌性，性腺发育至Ⅳ期。

　　(2)鲤鱼CS匀浆液的制备　按仇存网等的方法，取出鲤鱼CS称重后，加入一定比例的生理盐 水制备成10 mg/ml、5 mg/ml、2.5 mg/ml的CS匀浆液，3 000 r/min离心5 min后，取上清 液备用。

　　(3)实验方法　取小鼠48只，随机分为6组。正常对照组腹腔注射生理盐水，另一组腹腔注射 5 mg/ml的鲤鱼CS匀浆液；其余4组在腹腔注射5 mmol/L CaCl₂溶液的基础上，一组腹腔注 射生理盐水，另外3组分别腹腔注射2.5 mg/ml、5 mg/ml和mg/ml的鲤鱼CS匀浆液。上述6组 注射剂量均为0.2 ml/10 g体重。注射2 h后眼眶静脉丛采血，肝素抗凝，6 000 r/ min离 心5 min后取血浆备用。

　　(4)血浆钙、磷含量的测定　血浆钙、磷含量的测定分别按邻甲酚酞络合酮(OCPC)法和钼蓝 法进行，所用试剂均为北京中生生物工程高技术公司生产，操作步骤严格按产品说明进行， 722-光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂)比色测定。

　　(5)统计学方法　实验数据采用单因素方差分析进行统计学处理，结果用均数±标准差(±s)表示。

　　2　结果

　　按上述实验方法测得各组血浆钙与血浆磷水平见表1。经方差分析表明：(1)仅注射5 mg/ml 鲤鱼CS匀浆液和注射5 mmol/L CaCl₂溶液的小鼠与正常对照组小鼠相比，血浆钙水平分别 出现极显著降低(P＜0.01)或升高(P＜0.01)；而血浆磷水平分别出现升高(无显著性 差异)和显著降低(P＜0.05)，说明5 mg/ml 鲤鱼CS匀浆液对正常小鼠具有降血钙作用。( 2)在给小鼠腹腔注射5 mmol/L CaCl₂溶液基础上，分别腹腔注射不同浓度的鲤鱼CS匀浆液 的小鼠与仅注射5 mmol/L CaCl₂溶液的小鼠相比，三组小鼠血浆钙水平均出现极显著下 降（P＜0.01)，而血浆磷水平只在鲤鱼CS匀浆液达5 mg/ml以上时，才出现升高现象(P ＜0.01)；但与正常对照组小鼠相比，仅注射10 mg/ml鲤鱼CS匀浆液的小鼠血浆钙出现极 显著下降(P＜0.01),血浆磷水平均无显著性差异，这说明鲤鱼CS匀浆液具有缓解因注射5 mmol/L CaCl₂溶液而出现的高血钙和低血磷状况。

Tab.1 Effects of carp CS homogenate on con tents of plasma calcium

　　and phosphorus in normal mice and in the mice treated by

　　i.p 5 mmol/L CaCl₂ solution (±s,n=8)

　　(mmol/L)

　　(mmol/L)

　　^*　P＜0.05,^**　P＜0.01,vs normal control;^##　P＜0.01,vs CaCl₂(5mmol/L)group

    3　讨论

　　鱼类CS匀浆液对哺乳动物钙、磷代谢的影响效应已有报道。Leung等首先观察到CS具有降低 大鼠血钙的作用，他们给幼年雄性大鼠静脉注射美洲鳗鲡的CS粗提液后，大鼠出现剂量-依 赖性的低血钙反应。但Ukawa等分别给雄性大鼠注射适应于三种不同生活环境的鱼(淡水鳗鲡 、1/3海水金鱼及海水隆头鱼)CS匀浆液后，3小时内未观察到血清钙和血清磷浓度的显著性 变化。而Patel等给雄性大鼠注射鲤鱼CS匀浆液后1小时，大鼠即出现明显的低血钙和高血磷 现象，且雌鱼CS匀浆液较雄鱼CS匀浆液的作用更加显著。尽管这些作者的实验结果不完全一 致，但仍然可以说明鱼类CS匀浆液能对大鼠血钙和血磷水平生产影响。

　　从我们在小鼠上的实验结果来看，给小鼠腹腔注射雌性鲤鱼CS匀浆液2 h后能够使小鼠出现 血钙降低和血磷升高的现象，并且能使小鼠因注射5 mmol/L CaCl₂溶液出现的高血钙和低 血磷现象得以缓解，并存在剂量依赖效应。这些结果进一步证实鲤鱼CS分泌物能够影响哺 乳动物钙、磷代谢，但影响途径与机制有待进一步探讨。

　　河南省自然科学基金资助，No.994011700