氨基酸类药物是一类重要的营养药物，在临床上应用广泛。其葡萄糖大输液
制剂在加热或长期放置过程中能形成5-HMF以及加合物，而5-HMF及各种加合物皆
有一定的毒性。如何在研制生产过程中控制些杂质，保证药品的安全，是药品
研制、生产者当前面临的一项重要任务。本文由国家食品药品监督管理局药品审
评中心有关专家撰写，主要从药品审评技术的角度，详细介绍了检测以及控制这
些杂质的方法、措施，对于相关人员具有重要参考价值。当然，由于我国对
氨基酸类药物制成葡萄糖注射液时加合物等杂质的控制方法未统一，应尽可能主
动采用多种方法对其进行深入研究，而不拘泥于文中所列的方法。
——编者按
氨基酸类药物一般可做成水针、粉针以及氯化钠/葡萄糖大输液等制剂。其
葡萄糖大输液制剂由于使用等渗调节剂葡萄糖，在加热或长期放置过程中能形成
5-羟甲基糖醛（5-HMF）和5-羟甲基糠醛聚合物，5-HMF也可进一步与氨基酸形成
加合物；另外氨基酸类药物还可以和葡萄糖发生Maillard反应，形成一系列复杂
的加合物；而5-HMF及各种加合物皆有一定的毒性，因而氨基酸类药物制成葡萄
糖注射液时应严格控制溶液中的5-HMF及各种加合物等杂质的量，以确保临床用
药的安全性。
选择适宜的检测方法
由于在生产放置过程中，加合物皆可能有所增加，出于安全性的考虑，氨基
酸葡萄糖注射液的质量研究和质量标准中应增加多项检查，通过终点控制使该类
注射液中加合物的量控制在一定范围内以保证临床用药的安全性。
对于如何测定加合物，目前尚无统一的检测和质量控制的方法，可以通过颜
色检查法和HPLC等方法对其进行检测。
■颜色检查法较为粗略
多数氨基酸（色氨酸、苯丙氨酸等少数氨基酸除外）由于结构中含有的发色
团较少，因而紫外吸收皆较弱；葡萄糖为多羟基醛结构，紫外吸收也较小。而葡
萄糖产生的杂质5-HMF、5-HMF的聚合物、5-HMF与氨基酸形成的加合物、Maillard
反应产物分子中皆有较大的共轭结构，在远紫外区（400纳米附近）皆有一定的
紫外吸收，因而可以通过控制溶液的颜色来初步控制加合物的总量。目前，常用
的颜色检查有比色法和测定吸光度法。
比色法适用于在可见光区有一定吸收（即肉眼可见有一定的颜色）的注射液
的颜色检查。由于氨基酸类药物的葡萄糖注射液一般可见一定的颜色，因而可采
用比色法通过控制注射液的颜色来初步控制加合物的量，质量标准中一般应包括
溶液颜色的检查，限度一般定为不超过黄色1号或2号标准比色液。
测定吸光度的方法适用于在可见光区无吸收（肉眼看不到颜色）但在紫外区
有吸收的注射液的颜色检查。5-HMF在可见光区无吸收，但在284纳米有最大吸收，
因而中国药典通常采用吸光度检查法在284纳米测吸光度来控制葡萄糖大输液中5
-HMF的量。部分Maillard反应产物也仅有紫外吸收，而在可见光区无吸收，故采
用吸光度检查法在紫外区测定吸光度也可粗略控制溶液中加合物的量。
值得注意的是，控制溶液的颜色虽是控制加合物等杂质的重要的、有效
的手段，但其对杂质的控制力度是有限的。由于5-HMF及部分加合物只有紫外吸
收，在可见光区无吸收，因而溶液的颜色与溶液中的5-HMF/加合物的量并没有很
好的相关关系。如，葡萄糖大输液的颜色可能已超过标准规定，但溶液中5-HMF
的量，即在284纳米处的吸光度可能仍符合标准规定。另外，由于不同加合物在
紫外区的最大吸收波长可能不一致，因而测定吸收度的方法也有一定的局限性。
在实际的氨基酸葡萄糖注射液的质量研究及质量标准中，通常在检查溶液颜
色（比色法）的同时，在284纳米或其他波长处（如440纳米）测定溶液的吸光度，
二者相结合能更好地控制产品的质量。
■HPLC法更精确
检测溶液的颜色对杂质的控制是粗略的，且无法控制溶液中的单个加合物的
量。高效的相色谱（HPLC）法是一种控制5-HMF及各种加合物更为精确的方法，。
5-HMF及各种加合物皆有较好的紫外/可见吸收，采用普通的紫外/可见检测
器即可对这些杂质进行检测；而氨基酸和葡萄糖的紫外吸收皆较弱，在测定波长
一般对这些杂质的测定不会产生干扰，因而可采用普通HPLC-UV/VIS法来定量控
制5-HMF及各种加合物的量。中国药典2005年版葛根素葡萄糖注射液即采用普通HPLC
法，用外标法在284纳米处测定来定量控制5-HMF的量。根据同样的原理，该方法
也可以用来定量控制氨基酸葡萄糖注射液中的5-HMF、5-HMF的聚合物、Maillard
反应产物。
由于加合物的种类较为复杂，因而在进行检查时应进行较为详细的方法学试
验研究：可以先采用剧烈的条件（如提高溶液中氨基酸和葡萄糖的浓度、长时间
加热等）加速各种加合物生成，然后对含有较大量加合物的溶液进行线性、分离
度、检测限方法学研究和方法学验证以确定方法的可行性。
采用该方法色谱条件的确定一般依据实验结果，如波长的选择。由于不同的
氨基酸可以与葡萄糖形成不同的加合物，而且加合物可能有多种，而不同的加合
物有不同的紫外吸收，应根据试验测定的结果来确定波长，必要时可采用二极管
阵列检测器来确定合适的波长。实际的检测中，较常使用的检测波长一般在260~
400纳米左右。
由于氨基酸等主药在该色谱条件下没有吸收峰，因而不能采用主成分自身对
照法，而需要选用一个合适的参比物进行折算。由于葡萄糖大输液中会产生5-HMF
，其最大吸收波长在280纳米左右，较为合适，因而可选用5-HMF作为参比物。注
射液中5-HMF量的计算可采用外标法；其他加合物量的计算，由于加合反应历程
较为复杂，且不同的氨基酸生成的加合物的种类和量也不尽相同，无法一一精确
定量，可以与5-HMF相比，以5-HMF为参比物进行折算。
关于氨基酸葡萄糖注射液中加合物的限度，目前尚未统一，可参考中国药典
中葡萄糖大输液中对5-HMF所定的限度：1%葡萄糖注射液在284纳米处吸光
