第五节“DNA指纹”与法医鉴定

第五节　“DNA指纹”与法医鉴定

　　1979年Teffreys根据β珠蛋白基因座位近旁出现的RFLP频率同测定的核苷酸总数，推算出人体基因组的遗传异质性约为每100个核苷酸中有一个差异。后在人体DNA随机片段的文库中分离出高度变异的超变区。从1982年起，分别在人的胰岛素基因，α类珠蛋白基因，肌动蛋白基因和C-Ha-ras-1基因中陆续发现了些超变区。这是一些很短的顺序或称“小卫星顺序”串联重复所组成。不同等位基因的重复数目也不相同。只要用重复顺序内不含切点的限制性内切酶切割，就可产生长度不等的限制性片段。

　　短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp，但这些重复顺序几乎都共有“核心顺序”。“核心顺序”长10～15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针，同经限制性内切酶酶切的人体DNA作Southern印迹杂交，可以得长度不等的杂交带。杂交带的数目的分子量大小几乎不可能有两个人会完全相同的，因此把这种杂交带的图型称为“DNA指纹”（DNa finger-printing），意思是DNA的杂交带型同指纹一样，也是每个人所特有的。

　　表23-8比较了用两种探针进行印迹杂交后，出现杂交带的长度和数目。根据计算，如果只用一种探针，则A个体DNA所呈现的杂交带型，同样出现在B个体DNA中的概率为3×10^-11。如果同时用两种探针进行比较，则两个个体完全相同的概率小于5×10^-19。全世界人口为50亿，即5×10⁹。因此，两个个体的DNA杂交带型完全相同的可能性极小。

表23-8　随机匹配的个体间“DNA指纹”相同的概率

探针

DNA片段大小（k）

每一个体中片段

出现的数目±SD

A个体中的片段也出现于B个体的概率

A

10～20

2.8±1.0

0.11 　

6～10

5.1±1.3

0.18 　

4～6

5.9±1.6

0.28

B

10～20

2.9±1.0

0.08 　

6～10

5.1±1.1

0.20 　

4～6

6.7±1.2

0.27

　　1985年Teffreys等将“DNA指纹”应用于法医鉴定。他们从血斑、精斑或新鲜毛发根部抽提微量DNA后作印迹杂交。从4年前的精斑、血斑样品中仍能提取出来未降解的DNA，特别是设计出一些方法可从妇女阴道分泌物中，把混在里面的精子分离出来。从中提取DNA后可明确无误地鉴定谁是精子的供体。为法医鉴定提供新的有效方法。

参考文献

　　1．Drake JW, et al.Updating the theory of mutation. American Scientist, 1983; 71:621

　　2.Jukes TH, et al. Evolutionary nucleotide replacements in DNA.Nature, 1979;281:605

　　3.赵寿元.自然科学年鉴.上海翻译出版公司，1987

　　4．Maniatis T, et al. Moleculer cloning: A laboratory Manual. Cold Sping Harbor Laboratory, 1982

　　5.Myers RM, et al. Dctection of single base substitutions by ribonuclease cleavage at mismatches in RNA:DNA duplexes. Sicence, 1985;230:1242

　　6.Mullis K, et al. Specific enzymatic amplificaton of DNAin vitro. The polymerase chain reaction. Cold Spring Harbor Symposia on Qantitative Biol,1986; L1:263

　　7.金冬雁，等译.分子克隆实验指南.北京:科学出版社,1992

　　8.孙乃恩,等编著.分子遗传学.南京:南京大学出版社,1993

　　9.邱泽生,主编.基因工程.北京:首都师范大学出版社,1992

　　10.张昌颖,主编.核酸生物化学.北京:人民卫生出版社,1993

　　11.杜传书,刘祖洞,主编.医学遗传学.第二版,北京:人民卫生出版社,1992

（谭骏 郭华阳）