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第七节 PCR仪器的发展 PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。 为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备,现将部分国内外PCR扩增仪列表如下(表22-5);些仪器主要用变温铝块、变温水浴及变温气流的方式达到热循环的目的,各有其优缺点。国产1109型DNA扩增仪则是用恒温浴机械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B体积小,智能化与自动化程序高,可以兼做套式PCR,方便实用。以上各种仪器一般都配有微电脑自动控制温度、时间及循环数,可以达到节 省劳动力的目的。在采用这些仪器作PCR试验之前,一般均应实测管内温度变化循环情况,以了解升、降温时管内因热传导造成的温度滞后情况和实际到达的最高、最低温度,用于修正设计的循环参数。温度滞后受到所用Eppendorf管材料、壁厚及形状(与铝块孔匹配程度)的影响,这对变温铝块式仪器影响更大些。对于配用制冷机式半导体元件致冷的仪器,在使用低于室温的温度来保冷PCR反应后小管时,应注意冷凝水的问题,勿使流入仪器内浸湿半导体元件而损坏仪器。 表22-5 国内外生产的几种DNA扩增仪 仪器型号 生产厂家 型式 特点 管数 报价 1109型 北京新技术所与军科院联合 机械臂变温水浴 电子调温 40×0.5ml 16400元/台 90A/B型 中科院遗传所 机械臂 变温水浴 电热 14000元/台 PTC-51A/B型 军事医学科学院 变温气流 电子调兼作套式 30×0.5ml 12000元/台 DNA Thermal Cycler Perkin –ElmerCetus(美) 变温铝块 压缩机致冷 48×0.5ml US $ 20000.- Thermocycler #60 #00 #180 B..Braun Biotech (德) 变温水浴98℃四档 电热,自来水冷却 60×1.5ml 100×1.5ml 180×1.5ml DM 30000.- Automatic temperature Cy-cler Single Block Twin Block Ericomp Inc.(美) 变温铝块25~100℃ 电热,自来水冷却 29×1.5ml 58×1.5ml US $4985.- US $7980.- Grant Autogen Grant Instrumant Ltd(美) 变温水浴0~99℃ 电热,自来水冷却或加冷循环器 50×1.5ml or 50×1.5ml US $250. –plus US $ 15.-for Rack(x2) Techne PHC-1 PHC-2 Techne Ltd.(英) 变温铝块0~99℃三档 电热500W水冷100W 54×0.5ml 54×0.5ml 24×1.5ml £3383. – £3997. - BioOven BioThrm Corp(美) 变温气流 -150℃ 115V 11A 200’s of 4×96plate US $ 2990. - Trio-Thermo-block TB-1 Biomertra(德) 半导体变温 220V 3×20管 分别控温 DM12900. - Micro cycler E Eppendorf(美) 变温铝块 220V/100V 3×29管 US $ 3500. - |