第一法
除另有规定外,取各药品项下规定量的供试品,加水溶解,置于25ml的纳氏比色管中,加水稀释至10ml。另取规定色调和色号的标准比色液10ml,置于纳氏比色管中,两管同置白色背景上,自上向下透视,或同置白色背景前,平视观察;供试品管呈现的颜色与对照管比较,不得更深。
比色用重铬酸钾液
取重铬酸钾,研细后,在120℃干燥至恒重,精密称取0.4000g,置500ml量瓶中,加适量水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。每1ml溶液中含0.800mg的 K2Cr2O7。
比色用硫酸铜液
取硫酸铜约32.5g,加适量的盐酸溶液(1→40)使溶解成500ml,精密量取10ml,置碘量瓶中,加水50ml、醋酸4ml与碘化钾2g,用硫代硫酸钠液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液2ml,继续滴定至蓝色消失。每1ml的硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于24.97mg的CuSO4·5H2O。根据上述测定结果,在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液(1→40),使每1ml溶液中适含62.4mg的CuSO4·5H2O,即得。
比色用氯化钴液
取氯化钴约32.5g,加适量的盐酸溶液(1→40)使溶解成500ml,精密量取2ml,置锥形瓶中,加水200ml,摇匀,加氨试液至溶液由浅红色转变至绿色后,加醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)10ml,加热至60℃,再加二甲酚橙指示液5滴,用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显黄色.每1ml的乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于11.90mg的CoCl2·6H2O。 根据上述测定结果,在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液(1→40),使每1ml溶液中适含59.5mgCoCl2·6H2O,即得。
各种色调标准贮备液的制备
按下表量取比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液、比色用硫酸铜液与水,摇匀,即得。
各种色调标准贮备液的配制表 ────┬───────┬────────┬───────┬──── 色 调 │比色用氯化钴液│比色用重铬酸钾液│比色用硫酸铜液│ 水 │ (ml) │ (ml) │ (ml) │(ml) ────┼───────┼────────┼───────┼──── 黄绿色 │ 1.2 │ 22.8 │ 7.2 │68.8 ────┼───────┼────────┼───────┼──── 黄 色 │ 4.0 │ 23.3 │ 0 │72.7 ────┼───────┼────────┼───────┼──── 橙黄色 │ 10.6 │ 19.0 │ 4.0 │66.4 ────┼───────┼────────┼───────┼──── 橙红色 │ 12.0 │ 20.0 │ 0 │68.0 ────┼───────┼────────┼───────┼──── 棕红色 │ 22.5 │ 12.5 │ 20.0 │45.0 ────┴───────┴────────┴───────┴──── 各种色调色号标准比色液的制备 按下表量取各色调标准贮备液与水,摇匀,即得。 各种色调色号标准比色液的配制表 ────┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬── 色 号 │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │ 8 │ 9 │10 ────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼── 贮备液 │0.5 │1.0 │1.5 │2.0 │2.5 │3.0 │4.5 │6.0 │7.5 │10.0 (ml) │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ ────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼── 加水量 │9.5 │9.0 │8.5 │8.0 │7.5 │7.0 │5.5 │4.0 │2.5 │ 0 (ml) │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ ────┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──第二法
除另有规定外,取各该药品项下规定量的供试品,加水溶解使成10ml, 必要时滤过,滤液照分光光度法于规定波长处测定,吸收度不得超过规定值。