Kershaw等[19]已鉴定出来自H-2Kb-tsA58转基因鼠神经上皮的条件永生细胞群(conditionally immortalised cells),它们在干扰素诱导性H-2Kb启动子的控制下表达突变型SV40大T抗原等位基因。在允许温度下(330C),这些细胞可在体外培养基中加了bFGF时较长时间表达nestin(祖细胞特征分子),可被溴脱氧尿苷(BrdU,正在分裂细胞特征分子)着色。然而一旦置于非许可温度(370C)并移去bFGF则BrdU标记细胞分化成多种类型细胞、一些细胞表达神经元和神经原纤维特征分子(神经元特异烯醇酶,RT97),一些细胞具有递质特异反应性,另一些细胞则表达胶质细胞特征分子GFAP。因此,这一细胞群包含有不同分化能力的祖细胞,这些细胞能对缺血环境发生反应,在这种环境中、生长因子、细胞因子、神经营养因子和它们的高亲和性受体均能促进移植物成活、分化和突触形成[1]。研究者们已将H-2Kb-tsA58转基因小鼠神经上皮细胞宿主动物产生了具有与胚脑细胞移植同样有效的移植效应,并认为这些永生性神经细胞系以及来源于神经的更重要的和更具具潜力的移植供体,并将有可能避免未来脑内移植使用胎脑供体所面临的伦理和来源短缺问题。
最近,Borlongan等[5]将培养的还原于人胚胎肿瘤细胞系的神经元(NT2N)移植至栓塞性大脑中动脉闭塞致短暂局灶性脑缺血大鼠脑内的生物学效应。移植后1-6个月,移植NT2N细胞并用免疫抑制剂治疗的缺血动物与接受大鼠胎小脑细胞移植或仅给赋型剂的缺血动物相比,被动躲避试验明显改善,不对称运动行为明显正常化。冷冻保存NT2N细胞移植物与新鲜NT2N细胞移植物相比,在免疫抑制大鼠脑内更具活力,更能促进免疫抑制和缺血动物行为的恢复。这些结果提示,在神经移植治疗中枢神经系统疾病时,异种移植和冷冻保存在作为克隆细胞系移植物来源的有效工具。NT2细胞系是Andrew等从一种人类畸胎瘤中分离出来的一种胚胎癌细胞系,来自这种细胞系的细胞经过用视黄醛酸处理后,可以分化成类似神经元样细胞,故称NT2N细胞。在Borlongan的移植试验中,NT2N细胞移植后宿主动物并没有显示任何不良反应,进一步提示一些经处理后的人类癌性细胞克隆系也将可能是一种重要的脑内移植供体。
3 问题与展望
脑内移植至今仍是神经科学的前沿,因此目前仍将面临着许多重要的难题,如移植的免疫问题,供体的来源问题,以及移植物是否能长期存活和与宿主的整合问题等。但基于目前脑内移植实验研究的进展,建立和发展永生性神经细胞系及神经干细胞,仍将可能是今后缺血性脑损伤以及其他脑内移植治疗研究的重要方向。随着这些用于脑骨移植治疗的细胞系和细胞库的建立,将脑内移植与药物的保护治疗相结合,脑血管病的治疗也许将不再是一个难题。
参考文献略