2.4 肝门静脉及肠系膜静脉灌注法 分离人工感染的雏鸭10只和在流行区购买的阳性家鸭10只,分别检获成虫448条(雌虫197条,雄虫251条)和2554条(雌虫1231条,雄虫1323条)。每只人工感染的病鸭检获成虫22~56条,平均45条;每只购自流行区的阳性家鸭检获成虫194条~396条,平均255条。从20只病鸭所分离的成虫均为活虫。
3 讨论
毛毕属吸虫的终宿主主要为家鸭和绿头鸭、绿翅鸭、斑嘴鸭和斑背潜鸭、苍顶夜鹭等候鸟[1~10],其中家鸭是人们研究毛毕属吸虫常用的实验动物,无论是研究其生活史、分类还是流行病学调查都用家鸭作为成虫的动物模型。据以往文献记载,从家鸭体内分离毛毕吸虫,多采用肝门静脉、肠系膜静脉解剖法,而肝脏灌注法收集毛毕吸虫成虫,尚未见报道。从本次研究结果可见,肝门静脉、肠系膜静脉解剖法手工操作分离成虫较慢,费时费力,从解剖1只病鸭到其中的成虫分离完毕,一个人要花4~6h,因虫体较小,又与血液混合在一起,分离时不易看清,易漏检,且血凝后无法进行操作。因此,该方法成虫收集率低。应用肝脏灌注法(无论是采取在体灌注,还是离体灌注),从解剖1只病鸭到成虫分离完毕,一个人仅需用1~2h。因此肝脏灌注法与常规的肝门静脉、肠系膜静脉解剖法相比较,具有省时、省力,所获成虫虫体完整、洁净、便于活体测量和操作简便等优点,且成虫收集率也明显增高。因为鸭肝静脉位于心脏的背面,粗而短;门脉位于肠系膜中,既细又短,在体灌注有一定困难。因此,离体肝脏与在体肝脏灌注两者相比,前者更便于操作。但在离体肝脏灌注时,若操作不熟练、分离肝脏的时间长,可导致肝门静脉内血液凝固,灌洗出的虫体包裹在血凝块中,检出率将大受影响、甚至检不出成虫。由于鸭肝很脆弱,易损伤,故在灌注前插管和分离肝脏时,应细心操作。若操作不慎,肝脏出现裂损,可降低肝脏内的灌注压力,从而影响灌洗效果,使虫体不能全部冲出。较高的灌注压力和完整无损的鸭肝是灌注成功的关键。
虽然肝脏灌注法大大地提高了收集成虫的效率,但是,寄生于肠系膜内的成虫无法冲出,采用肝门静脉和肠系膜静脉同时灌注法较好地解决了这个矛盾,无疑是毛吸虫分离方法上的一大进步。
由于灌注法具有常规肝门静脉、肠系膜静脉解剖法不可比拟的优点,建议此方法应用于家畜(牛、羊)体内东毕吸虫成虫的分离。常规收集家畜东毕吸虫成虫的方法有二种:一是牛或羊肝门静脉解剖法;二是将牛或羊肝用刀切数下而不切穿,放于筛筐内冲洗,同时用手挤压20min,将筛内容物洗入量杯,用水反复沉淀,取沉淀渣检查虫体,费力、费时。应用灌注法可能会克服上述不足,产生更好分离效率。
关于毛毕吸虫在鸭体内的寄生部位,根据唐仲璋,唐崇惕(1962)报道,毛毕吸虫除寄生在门静脉和肠系膜静脉外,还可以寄生于肺和心脏。解剖9只鸭子共收集毛毕吸虫成虫233条,其中186条(79.83%)寄生于肝门静脉和肠系膜静脉,25条(10.73%)和22条(9.44%)分别寄生于肺部及心脏。因此要计算鸭体虫荷的多少,应对病鸭进行较细致的解剖和灌注,才能较客观地了解其毛毕吸虫感染度。作者已初步尝试采用肝脏和肠系膜静脉灌注法及灌注后再对肺、心进行解剖分离家鸭体内的毛毕吸虫成虫,此项工作尚待进一步完善、总结。此方法对于了解毛毕吸虫的分布和不同部位雌雄虫的比例具有价值。
(陈启仁、马长玲、芦王英、盛似春、张瑞德、赵志强、田雨香、李作恒、彭江龙、高亚辉等参与本研究,谨此一并致谢。)
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